Cours LES HEMOCULTURES

LES HEMOCULTURES 

I-INTRODUCTION : A-Le but : Les hémocultures sont réalisées pour différents buts :

• Mise en évidence des bactéries éventuellement présentes dans le sang de malades ayants un syndrome septicémique. Pour avoir des résultats positifs, il est indispensable de pratiquer le prélèvement avant et en dehors de toutes antibiothérapies.

• 2 groupes de germes peuvent être recherchés :

• Les germes qui obligatoirement au-cours de leur évolution dans l’organisme ont une phase septicémique et qui sont :’Salmonella typhi’, ‘paratyphi A’ et ‘paratyphi B’, ‘Brucella’, ‘Haemophilus influenzae’, ‘Neisseria méningitidis’ et les anaérobies telles les Clostridies.

• Les germes pour lesquels la phase septicémique est une complication de leur infection première et qui est généralement extra-sanguine. Il s’agit de Staphylocoques pathogènes, Salmonelles mineures, Streptocoques, Pseudomonas, Entérobactéries…etc.

B- Les indications : Les hémocultures sont indiquées en cas de :

• Fièvre d’origines diverses :

• Après un acte chirurgical. ➨Aggravation inexpliquée de l’état général.

• Déficit immunitaire. ➨Femme enceinte.

• Perfusion durable. ➨Grands brûlés.

• Atteinte cardiaque. ➨Nourrisson…etc.

• Infections localisées sévères.

• Hypothermie des infections à BGN. 
  C-Le prélèvement : Il est pratiqué au moment des pics fébriles. Tout en prenant les précautions suivantes :
  

• Asepsie de la région où est pratiqué le prélèvement (à l’Alcool iodé ou à la Betadine ou à défaut à l’Alcool à 70°.) Elle est aussi valable pour les doigts du préleveur.

• Eliminer, Après séchage, l’iode fixé par une friction avec un tampon de gaze stérile imbibé d’Alcool éthylique à 70°.

• Respecter le volume de sang à prélever (1 volume de sang pour 10 volumes de bouillon.)

• Utiliser un dispositif de prélèvement stérile, à usage unique ou une seringue stérile à usage unique.

• Acheminer rapidement le prélèvement au laboratoire. 1-Prédiction de la bactériémie : On se référant au tableau de Bates (ci-dessous), on prédit le risque de bactériémie.

• Si le score est supérieur ou égal à 6 ; Fort risque de bactériémie.

• Si le score est inférieur ou égal à 2 ; Faible risque de bactériémie.

FACTEURS	POINTS
Température maximale > 38°	3
Maladie rapidement fatale	4
Maladie terminale	2
Frissons	3
Toxicomanie par voie IV	4
Abdomen chirurgical	3
Facteurs de comorbidité majeure (coma, détresse respiratoire, arrêt cardiaque…etc.)	3

Le prélèvement se fait dans le flacon de Castaneda.

2- Additifs possibles:

˜ Atmosphère à 10% de CO2: Favorise la multiplication de 'Brucella', 'Neisseria', 'Haemophilus'…etc.

˜ Anticoagulants SPS (Sulfonate de Polyanétol de Sodium): Neutralise les systèmes bactéricides sanguins, inhibe la

phagocytose des PNN et neutralise les Polymixines et les Aminosides. 
˜ Saccharose à 10 ou 15%: Evite la lyse des bactéries à paroi déficiente. 
˜ Molécules Thiols: Favorise la multiplication des Streptocoques (endocardite.) Les Thiols neutralisent les

Aminosides. ˜ Vitamine K3, Hémine: Favorise le développement des germes exigeants comme l'Haemophilus' et les anaérobies. ˜ Inhibiteurs d'antibactériens: Pénicillinase pour les β Lactamines et l'APAB pour les sulfamides.-

II- LECTURE :

• L’observation des flacons est quotidienne.

• La présence de voile, de trouble, d’hémolyse, de gaz ou de poussées signifie la multiplication bactérienne.

• La durée de l’observation va de 10 à 30 jours.

• Si une hémoculture est positive, la poussée bactérienne est de 1 à 5 jours exception faite pour les Brucelles qui nécessitent 30 à 40 jours.

• S'il y a croissance, on fait :

• Un examen microscopique.

• Un isolement sur milieu choisi en fonction de cet examen microscopique.

III-INTERPRETATION : A-Hémocultures positives:

• L’interprétation est simple lorsqu’il s’agit de bactéries pathogènes spécifiques ‘BPS’, l’isolement de telles bactéries impose le diagnostique (ex : ‘Salmonella typhi’, ‘Brucella’, ‘Neisseria méningitidis’ et ‘Straptococcus pneumoniae’.)

• L’interprétation est plus complexe lorsqu’il s’agit de bactéries pathogènes opportunistes ‘BPO’. Dans ce cas, il est indispensable de pratiquer plusieurs prélèvements pour que le biologiste et le clinicien puissent éliminer une souillure probable sauf si la bactérie est retrouvée dans d’autres prélèvements du même malade (cathéter, abcès, LCR, urines…etc.) On cite essentiellement le ‘Staphylococcus’, ‘Klebsiella’ et ‘Proteus’.

• Il est rare de trouver une hémoculture à plusieurs bactéries de différentes espèces soit dans un même flacon, soit lors d’hémocultures successives. Ces cas sont surtout observés chez les malades immunodéprimés, les porteurs de cathéter et les agonisants.

NB:

∗

La positivité d'une hémoculture peut être retardée dans le temps par rapport à la rapidité d'obtention des cultures de 
repiquage. Ceci est dû à 3 éléments: 

• Une faible densité bactérienne.

• Un état lésé des corps bactériens.

• La phagocytose.

∗

Il ne faut pas oublier les germes dont la multiplication n'entraîne pas toujours de troubles visibles comme le 
'Pseudomonas', 'Haemophilus influenzae' et les Bactéroïdes.

B- Hémocultures négatives: Une hémoculture négative signifie l'absence de bactéries dans le sang. Mais il existe de faux négatifs notamment observés lors de:

• Prélèvement effectué tardivement au-cours de la maladie.

• Prélèvement fait sous antibiothérapie.

• Quantité insuffisante de sang (densité bactérienne.)

• Milieu ou conditions de cultures inappropriés.

• Temps d'observation trop court.

IV- CONCLUSION:

• L'hémoculture reste l'examen de choix pour caractériser l'espèce bactérienne responsable d'une septicémie ou d'une bactériémie.

• Cet examen ne peut être réussi que s'il y a respect:

• Des indications.

• Des conditions de prélèvement.

• L'interprétation suppose une collaboration étroite entre le clinicien et le biologiste.